Kriva doza – učinek. Razmerje med odmerkom in učinkom. Trajanje učinka je odvisno od odmerka in ure v dnevu

Krivulja odmerek-učinek (oz koncentracija-učinek) To pomeni spreminjanje infuzije danega liganda na biološki objekt glede na koncentracijo tega liganda. Tako krivuljo lahko opazimo tako za posamezne celice ali organizme (če majhne doze ali koncentracije povzročijo šibek učinek, velike pa močan učinek: stopenjska krivulja) ali za populacijo (v tem primeru je treba zaščititi, v ki ima več sto posameznikov enak učinek) koncentracija ali odmerek liganda vpliva na učinek: korpuskularna krivulja ).

Spreminjanje razmerja med odmerkom in učinkom ter uporaba podobnih modelov je glavni element za določanje intervala terapevtskih in varnih odmerkov in/ali koncentracij zdravil in drugih kemičnih snovi, s katerimi pridejo v stik ljudje in drugi biologi.Izvirni predmet.

Glavna parametra, ki se merita v vsakem modelu, sta največji možni učinek (Emax) in odmerek (koncentracija), ki povzroči največji učinek (ED 50 in EC 50, podobno).

Pri izvajanju te vrste preiskave mora mati upoštevati, da mora razmerje med odmerkom in učinkom ostati od časa izpostavljenosti biološkemu predmetu do konca preiskave (vdihavanje, zaužitje, zaužitje na Iru Toscho ); Zato bo široka ocena učinka ob različnih časih izpostavljenosti in različnih načinih prejemanja liganda v telo pogosto vodila do različnih rezultatov. Tudi pri eksperimentalnih raziskavah se ti parametri lahko poenotijo.

Moč je ukrivljena

Kryva Dose-Estabulum je dragi graf, prikaz prizorišča biološkega O'Ct. Po mnenju raziskovalca se je mogoče zanašati na fiziološke in biokemične procese ter določiti stopnjo umrljivosti; Dandanes lahko posamezne smrti vključujejo več posameznikov (z različnimi stopnjami umrljivosti), urejene opisne kategorije (na primer stopnja upadanja) ali fizikalne in kemične enote (višina krvnega tlaka, aktivnost encimov). Glede na klinično preiskavo opazimo številne učinke na različnih organizacijskih ravneh predmeta preiskave (klinični, tkivni, organizmski, populacijski).

V primeru dnevnega odmerka se navede odmerek preskušanega zdravila oziroma njegova koncentracija (izračunana v miligramih ali gramih na kilogram telesne teže oziroma v miligramih na kubični meter prostornine pri inhalaciji) in je vzdolž abscisne osi. , velikost učinka pa je vzdolž ordinatne osi. V določenih situacijah (kar pomeni, da obstaja velik razkorak v odmerkih med najmanjšim učinkom, ki ga je mogoče zabeležiti, in največjim možnim učinkom) se na ordinatni osi prikaže logaritemska skala (ta možnost se imenuje izvirne koordinate »superlogaritma«) Najpogosteje ima krivulja odmerek-učinek sigmoidno obliko in je opisana s Hillovim nivojem, kar je še posebej očitno v sublogaritemskih koordinatah.

Statistična analiza krivulje se izračuna z uporabo statističnih regresijskih metod, kot so probit analiza, logit analiza ali Spearman-Kerberjeva metoda. V tem primeru bodo modeli, v katerih je uporabljen nelinearni približek, verjetno dali prednost v primerjavi z linearnimi ali lineariziranimi, saj se empirični pojav zdi linearen v primerjavi z opazovanimi intervali: to je posledica dejstva, da je v absolutni večini odmerkov učinki, so mehanizmi razvoja učinka nelinearni, sicer se lahko eksperimentalni podatki zdijo linearni v določenih posebnih pogojih in/ali v določenih intervalih odmerjanja.

Zagalni respekt

Spekter manifestacij toksičnega procesa je označen s toksikantom. Vendar pa je resnost učinka, ki se razvije, odvisna od jakosti učinkovine.
Za določitev števila besed, ki veljajo za biološki objekt, uporabljamo koncept doze. Na primer, vnos toksikanta v količini 500 mg v lupino garja z 250 g in zajca z 2000 g pomeni, da živali dobijo odmerek približno 2 in 0,25 mg/kg (koncept " odmerek« ne bo upoštevan v poročilu).
Odnos »odmerek-učinek« lahko zasledimo na vseh ravneh organizacije žive snovi: od molekularne do populacijske. V tem primeru je v večini epizod registra skrivni vzorec: z višjimi odmerki se stopnja poškodbe sistema poveča; Postopek se konča z več elementi za shranjevanje.
Ne glede na trenutno dozo je lahko kakršen koli govor za pojoče ume škodljiv za telo. To velja za toksične snovi, ki delujejo lokalno (tabela 1) in po resorpciji iz notranjega medija (tabela 2).

Tabela 1. Razmerje med koncentracijo formaldehida v zraku, ki ga vdihavamo, in resnostjo toksičnega procesa

(P.M. Misiak, J.N. Miceli, 1986)

Tabela 2. Odlaganje med koncentracijo etanola v krvi in resnostjo toksičnega procesa

(T.G. Tong, D. Pharm, 1982)

V manifestaciji razmerja "odmerek-učinek" se pretaka notranja in medvrstna raznolikost organizmov. Dejansko se posamezniki, ki pripadajo isti vrsti, dejansko razlikujejo med seboj po biokemičnih, fizioloških in morfoloških značilnostih. To je posledica pomembnosti njihovih genetskih značilnosti. Še bolj izrazita je zaradi enakih genetskih značilnosti medvrstna pestrost. V zvezi s tem se lahko odmerek posamezne snovi, v katerem vpliva na propadanje organizmov iste in poleg tega različnih vrst, včasih zelo razlikuje. Tudi razmerje »odmerek-učinek« vpliva na organe tako na toksikant kot na organizem, ki je drugačen. V resnici to pomeni, da je treba široko oceno toksičnosti, ki temelji na preučenem razmerju med "odmerkom in učinkom", opraviti v poskusih na različnih bioloških objektih in mora nujno iti v statistične metode. ki danikh, scho otrimutsya.

Razmerje "odmerek-učinek" med okoliškimi celicami in organi

2.1. Spoštovanje vnaprej

Najenostavnejši objekt, potreben za registracijo biološkega toksikanta, je celic. Z razvojem toksičnih mehanizmov se te določbe pogosto izpustijo, pri čemer se pozornost osredotoča na oceno značilnosti interakcije kemične snovi s ciljnimi molekulami (bolj neverjetno). Takšen poenostavljen pristop, ki je upravičen v začetnih fazah dela, sploh ni sprejemljiv, če preidemo na razumevanje osnovne pravilnosti toksikologije - razmerja "odmerek-učinek". Na tej stopnji je treba upoštevati jasne in jasne značilnosti reakcije vsakega efektorskega aparata bioobjekta na naraščajoče odmerke strupenih snovi in jih primerjati z zakonitostmi delovanja ksenobiotika pri molekularni primerjavi.

2.2. Osnovni pojmi

Receptorski koncept delovanja toksikantov na celico ali organ prenaša, ki temelji na reakciji jezika z biološko strukturo - receptorjem (oddelek "Mehanizem delovanja"). Najgloblje ugotovitve so nastale med študijami modelov interakcije ksenobiotikov s selektivnimi receptorji endogenih bioregulatorjev (nevrotransmiterjev, hormonov itd.). V takšnih študijah so bile ugotovljene osnovne zakonitosti, ki so osnova razmerja "odmerek-učinek". Znano je, da je interakcija govornega kompleksa z receptorjem podvržena zakonu aktivnih mas. Vendar v hipotetičnih primerih ni dokazov, ki bi omogočali razumevanje specifičnih značilnosti primarne reakcije in resnosti učinka na strani celotnega biološkega sistema. Za rob gub je običajno opaziti dve toksikometrični značilnosti ksenobiotika:
1. Afiniteta – odraža stopnjo afinitete toksikanta do receptorja te vrste;
2. Učinkovitost – označuje produkcijo govora in pevski učinek po interakciji z receptorjem. V tem primeru ksenobiotike, ki delujejo kot endogeni bioregulator, imenujemo agonisti. Spojine, ki blokirajo delovanje agonistov, imenujemo antagonisti.

2.3. Afiniteta

Spreminjanje afinitete toksikanta do receptorja je v bistvu posledica eksperimentalne obdelave koncentracije med količino snovi, ki je dodana v inkubacijski medij, in količino, ki nastane kot posledica interakcije toksikant- receptorski kompleks. Primarna metodična tehnika je raziskava radioliganda (čudovita stvar).
V skladu s starodavnim zakonom aktivnih mas je treba zagotoviti pomen afinitete, tako da se preiskovalec zaveda velikih značilnosti mesta v medijih manj kot udeleženci v procesu - toksikanta [P]. Število [R]T receptorjev, ki sodelujejo pri reakciji, še ni znano. Obstaja metodični pristop, ki vam omogoča, da izboljšate to kompleksnost med potekom poskusa in na stopnji analize obdelave rezultatov.

2.3.1. Opis interakcije "toksikant-receptor" je skladen z zakonom učinkovin

Če najenostavneje opišemo proces krepitve govornega receptorskega kompleksa, so kinetične značilnosti reakcije drugačnega reda.

V skladu z zakonom o vrstah:

K D – disociacijska konstanta za kompleks “toksikant-receptor”.
1/K D je konstanta asociativnega procesa, to je stopnja afinitete toksikanta do receptorja.
Fragmenti števila receptorjev v sistemu, ki je podvržen interakciji (kultura celic, izoliran organ itd.), Je vsota močnega [R] in vstopi v interakcijo z govornimi receptorji, nato:

[R]T = + [R] (3)

Z urakhuvannyam rіvnyan (2) in (3), maєmo

/[R] T = y = [P]/([P] + K D) (4)

Stopnja nasičenosti receptorja s toksikantom "y" je razvoj receptorja, ki je povezan z govorom, do končnega števila receptorjev. Količina fragmentov kompleksa, ki jih je mogoče določiti eksperimentalno, kaže na možnost razširitve vrednosti K D na isto raven (4). Grafični prikaz nasičenosti receptorja v odvisnosti od koncentracije toksikanta v mediju ima lahko videz hiperbolečine, ki jo lahko uporabimo tudi za določitev vrednosti disociacijske konstante.

2.3.2. Večji modeli interakcij toksikantov in receptorjev

Eksperimentalno so krivulje, povezane s toksikantom na receptorjih, pogosto strme ali položne, vendar jih je mogoče opazovati v skladu z zakonom aktivne mase. Včasih se razkrije stopnja nasičenosti receptorja s toksikantom glede na njegovo koncentracijo. Prosimo, pojasnite to na tri načine:
1. Reakcija med molekulo in receptorjem ni bimolekularna. V tem primeru je potrebna drugačna oblika dodelitve, se uvrstitvam (4) predstavi naslednje:

Y = [P] n /([P] n + K D) (5)

De n (Heal constant) – formalno predstavlja število molekul toksikanta, ki sodelujejo pri tvorbi enega kompleksa “toksikant-receptor”.
2. Populacija receptorja, s katerim toksikant interagira, je heterogena. Torej, če se v biološkem objektu nahajata dva podtipa receptorjev v enakem številu, ki sta ločeni s 3-kratno vrednostjo asociacijske konstante kompleksa "toksikant-receptor", potem je skupna vrednost Healove konstante določena z odvisnostjo in dražji 0,94. Pri visokih vrednostih se vrednost asociacijskih konstant in njihova integralna vrednost še poveča na 1,0.
3. Pomemben vpliv na proces vzpostavitve kompleksa "toksikant-receptor" lahko vključuje takšne pojave, kot so spremembe v konformaciji receptorja, kooperativnost njegovih sosednjih podenot in različni alosterični učinki. Tako ima krivulja, ki povezuje toksikant z receptorjem, pogosto S-podoben videz. Pomembno je opozoriti na medsebojni dotok vaskularnih predelkov, povezanih s strupenim sredstvom in makromolekulo (na primer, ustvarjanje kompleksa z eno podenoto receptorja povzroči spremembo njegovega odnosa z drugimi močnimi podenotami). Podobnemu učinku se izognemo z vezavo acetilholina s pripravkom tkivnih membran, da ciljamo na holinergični receptor. Povečano koncentracijo prostega [3H]-acetilholina v inkubacijskem mediju spremlja povečanje afinitete govora do receptorskih proteinov (slika 1). Lokalni anestetik, ko ga dodamo inkubacijskemu mediju, poruši kooperativnost receptorjev in s tem poveča afiniteto acetilholina do njih. Posledično opazimo spremembo oblike krivulje "povezava - koncentracija toksikanta" in se spremeni iz S-podobne v prvotno hiperbolično.

Malyunok 1. Vbrizgavanje prilokaina v proces vezave acetilholina na holinergični receptor (J. B. Cohen et al., 1974)

2.4. Učinkovitost

Numerične študije so pokazale, da med produkcijo govora, tvorbo kompleksa z receptorjem pesmi in resnostjo biološkega učinka, ki se pojavi z njim (na primer skrajšanje gladkih razjednih vlaken črevesne stene, sprememba srčnega utripa, skrivnost vida itd.) še zdaleč ni Najprej se bo zravnala hladnost. Za opis rezultatov eksperimentalnih študij, ki so bile preučene, temelji na nizki teoriji.
Kot smo že omenili, lahko vse strupene snovi, ki mentalno interagirajo z receptorjem, razdelimo na agoniste in antagoniste. Pri kateri nižji se pri dani koncentraciji toksikanta pojavijo naslednji simboli: [A] - koncentracija agonista; [B] – koncentracija antagonista.

2.4.1. Okupacijske teorije

Najpomembnejša od teh teorij je bila teorija Clarke (1926), ki je domneval, da je izraz učinka, ki se mu je treba izogniti, linearno povezan s številom receptorjev, ki jih pokriva toksikant (/[R]).
Kako teče iz reke (4)

/[R] T = [A]/([A] + K A) = E A /EM (6)

De E A – intenzivnost učinka zaradi delovanja agonista pri stalni koncentraciji;
E M - največji možni učinek s strani proučevanega biološkega sistema;
K A je disociacijska konstanta za kompleks agonist-receptor.
V skladu s Clarkovo teorijo se 50 % obsega učinka razvije pri takem odmerku agonista, ki zavzame 50 % receptorjev ([A] 50). Ta odmerek govora se imenuje zmerno učinkovit (OD 50).
Podobno, v skladu z zakonom delovanja, obstaja medsebojno delovanje med receptorjem in antagonistom, ne da bi pri tem prišlo do kakršnega koli učinka.

Do B = [B][R]/[BR] (8)

De K V je disociacijska konstanta za kompleks receptor-antagonist.
Če agonist in antagonist delujeta na receptor hkrati, potem se seveda zmanjša število receptorjev, ki se vežejo na agonist. Število receptorjev v biološkem objektu lahko označimo kot

[R] T = [R] + + (9)

V skladu z analizirano teorijo je toksikant lahko agonist ali antagonist. Vendar pa rezultati numeričnih študij kažejo, da takšna klasifikacija govorov ne zadošča za opis učinkov, pred katerimi se varujemo. Ugotovljeno je bilo, da največji učinek različnih agonistov, ki delujejo na isti receptorski sistem, ni enak.
V ta namen je Stephenson (1956) predlagal tri subsumpcije:
- največji učinek lahko agonist doseže v tistih primerih, ko je zaseden le majhen del receptorjev;
- učinek, ki se razvije, ni linearno povezan s številom receptorjev;
- Toksikanti imajo lahko različno učinkovitost (verjetno vzbujajočo aktivnost). To povzroči učinek, ki vpliva na receptor. Vendar morajo besede z različno učinkovitostjo, da dosežejo enak učinek, pokrivati različno število receptorjev.
Očitno je, da moč učinka ni samo v številu zasedenih receptorjev, temveč v velikosti katerega koli dražljaja "S", ki nastane, ko se ustvari kompleks "toksikant-receptor":

E A /E M = (S) = (e/[R] T) = (ey A) (10)

Kjer je e brezdimenzijska vrednost, ki označuje učinkovitost agonista. Po Stephensonu ima strup po vsem svetu učinek, ko deluje z receptorskim kompleksom. Kilkisno Stephenson pomemben e = 1, iz razloga, da največji učinek govora na biosistem postane 50% teoretično možne reakcije reakcije biosistema na prebujajoči se dražljaj.
Furchgott (1964) je domneval, da je vrednost "e" neposredno v koncentraciji receptorjev v ozadju v biološkem sistemu [R] T, v stoletju pa je bil uveden dodatni koncept "notranje učinkovitosti" govora (), katerega vrednost se izraža kot sorazmerna koncentracija receptorjev v sistemu

E/[R] T (11)

Kako teče iz reke (10)

E A / E M = ([R] T y A) (12)

Zamenjava virazu (6) izenačenje (12) pripelje do

E A / E M = (e [A] / ([A] + K)) (13)

Ker se koncentracija receptorjev, ki so pripravljeni na interakcijo z receptorskim agonistom, spremeni za q-krat (z ireverzibilno blokado receptorskega antagonista), postane dejanska učinkovitost spremljanja govora enaka q, poleg tega pa pride na vidik tudi q nanny (13).

E A * / E M * = (qe / (+ K)) (14)

Ta vzorec je grafično predstavljen z otrokom 2.

Slika 2. Učinek histamina na pripravek tankega črevesa morskega prašička v možganih dolgotrajne blokade receptorjev z dibenaminom (OD 50 = 0,24 μM; K A = 10 μM; e = 21) (R.F. Furchgott, 1966 )

Drugi koncept, ki nam omogoča, da opišemo razmerje med trenutno koncentracijo govora in resnostjo učinka, ki se razvije, je predlagal Arians (1954). Avtor predlaga, da se končni govor označi z vrednostjo, ki je označena kot "notranja dejavnost" (E)

(E) = E A.MAX /EM (15)

Teoretično možni največji učinek pa lahko eksperimentalno izmerimo le z dodatkom močnega agonista, vrednost E za večino govora leži v intervalu 0< Е <1. Для полного агониста Е = 1, Е антагониста равна 0.
Tako se lahko najmočnejši biološki učinek razvije, ko toksikant zasede del receptorjev. V tem primeru bo nepopravljiva povezava s številom receptorjev verjetno povzročila premik krivulje "odmerek-učinek" v desno, ne da bi zmanjšala velikost največjega učinka. Šele po prehodu med receptorji, ki se vežejo na antagonist, se obseg največjega učinka začne zmanjševati.
Med raziskavo je razmerje med odmerkom in učinkom s položajem poklicnih teorij za karakterizacijo toksikantov določeno z naslednjimi parametri:
1. K A - asociacijska konstanta s kompleksom agonist-receptor (pK A = -lgK A). Torej se vrednost vrednosti pogosto ocenjuje s posredno metodo (to je ne glede na količino ustvarjenega kompleksa "toksikant-receptor", temveč glede na obseg učinka, ki se razvije, ko se doda majhna količina toksičnosti). na medij) na podlagi koncepta »dražljajev«, skratka, govorimo o »pripravljanju« asociacijskih konstant.
2. EC 50 ali OD 50 - takšne koncentracije ali odmerki toksikanta, pri katerih nastane reakcija v biološkem objektu, je enaka intenzivnosti 50% največje možne (pD 2 = -lgED 5 0).
3. Do - disociacijska konstanta na kompleks receptor-antagonist. Moč delovanja kompetitivnega antagonista lahko izrazimo le z enim parametrom – afiniteto do receptorja. Ta parameter se oceni, ko se agonist doda pred inkubacijskim medijem.

2.4.2. Teorija "medsebojne pretočnosti"

Za razjasnitev podatkov, ki nastanejo v procesu preučevanja razmerja med odmerkom in učinkom, ki jih ni mogoče razumeti s stališča okupacijske teorije, je Peton (1961) predlagal teorijo »recipročne fluidnosti«.
Predpostavimo, da resnost reakcije biološkega sistema na določen govor ni določena le s številom receptorjev, ki ga zasedajo, temveč tudi s hitrostjo, s katero govor komunicira z receptorjem in nato zapusti. bodi nekaj novega. Avtor je prišel do naslednje razlage: receptor, ne orgelska tipka, je mesto, kjer pritisnete močneje, se zvok povleče, klavirska tipka pa je mesto, kjer se zvok potegne v trenutku udarca, nato pa, ko dolgo pritiskate na tipkovnico Da, zvok še vedno izzveni.
V skladu s Petonovo teorijo so močni agonisti snovi, ki pogosto absorbirajo in pogosto odvzamejo receptor; Antagonizmi so stvari, ki trajno vežejo receptor.

2.4.3. Teorije konformacijskih sprememb v receptorju

Zaradi številnih razlogov se zdi, da je krivulja "odmerek-učinek" hiperbolična v svoji funkcionalni pomembnosti. Heal koeficient teh krivulj ni večji od 1 (čudovito). Kot je bilo že omenjeno, je te značilnosti, kot tudi S-podobno naravo krivulj odmerek-učinek inode, mogoče razložiti s pojavom kooperativne interakcije receptorskih proteinov. Pokazalo se je tudi, da številni kemični modifikatorji receptorjev (na primer ditiotreitol - potomec sulfhidrilnih skupin), nereverzibilni blokatorji holinergičnih receptorjev (na primer haloalkilamini) in druga antiholinergična zdravila (atropiki) n), kompetitivni mišični relaksanti, lokalni anestetiki in številne druge snovi. za agoniste, ki se pretvorijo iz S-podobnega v hiperbolični.

Za pojasnitev teh in drugih pojavov, ki jih je pomembno razlagati s stališča okupacijskih teorij (senzibilizacija in desenzibilizacija receptorjev med delovanjem agonistov), sta Katz in Teslef že leta 1957 pri uporabi mišičnih relaksantov nastala ciklična (konformacijska) opazovan je bil model interakcije.
Model temelji na pojavu, da je receptor [R] receptor, zato je lahko kompleks “toksikant-receptor” aktiven (RA, RP A) in neaktiven (RI, RP I). To je shematično predstavljeno z otrokom 3.

Malyunok 3. Shema interakcije med toksikantom in receptorjem je skladna z modelom Katz-Teslef.

Ta model nam omogoča razlago učinka agonistov in kompeticijskih antagonistov na receptor.
Agonist, kot je acetilholin, sodeluje z RA, tako da ima kompleks RP A večjo afiniteto do RA kot pred R I. Razlika med RP A in RP I je povezana s stranjo RP A, fragmenti R I imajo nizko afiniteto do agonista in kompleks RP I disociira od učinkov prostega R I. Tuljava učinka nastane na stopnji konformacijske transformacije RP A RP I. Intenzivnost dražljaja, ki se pojavi v biološkem sistemu, je v številu takih transformacij v eni uri. Konkurenčni antagonisti, na primer d-tubokurarin, so lahko bolj združljivi z RA in zmanjšajo učinek agonista, vključno z nekaterimi receptorji v procesu interakcije z ostalimi.
Na podlagi tega modela je praktično nemogoče eksperimentalno določiti vrednosti pretvorbenih konstant ali notranje aktivnosti agonistov. Zato so se doslej v poskusih, kot prej, pogosto uporabljali okupacijski modeli.

Razmerje med odmerkom in učinkom je enako telesu

3.1. Spoštovanje vnaprej

Biološki sistemi, ki se v toksikologiji uporabljajo za preučevanje razmerja »odmerek-učinek«, vključujejo tkiva, organe in celoten organizem. Občutljivost različnih organov in telesnih sistemov na strupene snovi ni enaka. Zato je ta stopnja potrebna za preiskavo razvitih značilnosti toksičnosti sledljive snovi.
Presaditev izoliranih organov iz umetnih možganov, ki modelirajo naravno okolje, je lahko zelo pomembna za razumevanje mehanizmov interakcije med toksikantom in organizmom. Opis teorije o receptorskem delovanju toksikantov je pomembno oblikovan na podlagi podatkov, pridobljenih s samimi študijami na izoliranih organih. Ni presenetljivo, da imajo raziskave teh predmetov pomembno vlogo v toksikologiji.

3.2. Krivulja odmerek-učinek

Na splošno lahko domnevamo, da ima krivulja "odmerek-učinek" agonista v sublogaritmičnih koordinatah (logaritem odmerka - intenzivnost učinka) S-podobno obliko, ne glede na številne različne in drugačne značilnosti funkcij, ki se izvajajo. ocenjeno. Metoda, ki je poleg tega odvisna od zgodbe, ali toksikant sproti dodajamo v inkubator ali enkratno nanašanje snovi na biološki objekt v naraščajočih koncentracijah, nima bistvenega vpliva na rezultat, saj Učinek ni ocenjen v absolutnem znesku, ampak je izražen v stotinah kot največji možni ( 100%). Določitev ustreznih vrednosti je nujno potrebna, saj je vsak biološki pripravek, če je skrbno pripravljen, edinstven v vseh pogledih, vključno z občutljivostjo na kemične snovi. Poleg tega se z napredovanjem poskusa reaktivnost zdravila zmanjšuje. Ti objekti prenašajo obvezno standardizacijo predmeta pred nadaljnjo preiskavo. Grafični prikaz krivulje odmerek-učinek toksikanta P, poravnan s krivuljo za vsak standardni govor, nudi vse potrebne informacije o delovanju P, vključno z njegovimi toksikometričnimi značilnostmi.
Fragmenti konstantne izravnave krivulj, dobljeni med poskusom, so tehnično težko izvedljivi, najpomembnejši parametri krivulj pa se pogosteje prilagajajo.

3.2.1. Povprečni učinkoviti odmerek (OD 50)

p align="justify"> Glavni parameter razmerja "odmerek-učinek" za toksikant in biološki objekt je vrednost povprečne efektivne doze (OD 50), torej. takšna doza govora, ko se nanese na predmet, razvije učinek, ki je več kot 50% največjega možnega. Pri delu na izoliranih organih izračunajte vicor vrednost EC 50 (povprečna efektivna koncentracija govora v vzorcu). Učinkoviti odmerki temeljijo na enotah mase toksičnega sredstva na enoto mase biološkega predmeta (na primer mg/kg); efektivna koncentracija - v enotah mase strupene snovi na prostorninsko enoto medija (na primer g/liter; m/liter). Zamenjajte vrednost OD 50 z negativnim logaritmom: -log ED 50 = pD 2 (tabela 3).

Tabela 3. Vrednosti pH 2 za aktivne toksikante, izolirane v poskusu na izoliranem organu (učinek, ki se ocenjuje, je skrajšanje mesnih vlaken na zdravilo) (J.M. Van Rossumm, 1966)

3.2.2.Živahna dejavnost

Drugi parameter razmerja "odmerek-učinek" je relativna aktivnost toksikanta, vrednost, ki je opredeljena kot učinek, ki ga toksikant povzroči pri danem odmerku, do največjega možnega učinka, ki se razvije pri delovanju na biosistem. Ta lastnost je označena, kot je bila običajno označena, s količino notranje govorne aktivnosti (E).
V ožjem pomenu besede ta koncept opisuje pojav prevlade moči agonistov z jasnimi razlagami manifestacij o mehanizmu njihovega toksičnega delovanja. Vendar se v tem času pogosto interpretira v širšem smislu kot znak enake aktivnosti govorov, ki napihujejo pesmi moči, ne da bi uskladili mehanizme, poleg tega pa smrad sproži učinek, ki se ga brani. Pri dojenčku 4 so predstavljene krivulje "odmerek-učinek" serije izrazov, ki se spreminjajo z vrednostmi E in, očitno, OD 50, ki je parasimpatična veja avtonomnega živčnega sistema.

Risba krivulje "odmerek-učinek" serije parasimpatomimetikov (0< Е < 1,0), полученные на препарате изолированной тонкой кишки крысы. (J.M. Van Rossumm, 1966)

3.3. Biološko obilje

Povedano je bilo že, da je mogoče na istem biološkem objektu izvesti vrsto toksikoloških poskusov (v najenostavnejših primerih živali vbrizgati odmerek govora; v inkubaciji dodati medij za odstranitev solacijskega organa, rehina v naraščajoči koncentraciji). itd.). Preučevanje razmerja "odmerek-učinek" za enega ali več toksikantov zahteva izvedbo anonimnih poskusov, ki prenašajo rezultate velikega števila bioloških objektov. Čigav raziskovalec se sooča s pojavom biološke utrujenosti. S skrbnim izborom pa zožimo objekte, ki so hkrati izjemno občutljivi in neobčutljivi na kemične snovi, da dosežemo želeno variabilnost pri pridobivanju rezultatov. Pomembno se je zavedati, da način, kako je ta pojav oblikovan med analizo eksperimentalnih podatkov, pogosto vpliva na implikacije nadaljnjih značilnosti strupenih snovi.
Osnova pojava biološke obstojnosti je metoda povprečenja podatkov. Ko je vrednost OD 50 nastavljena, se zdi, da je bilo izvedeno povprečenje doz, ki določa učinek na več bioloških objektov, kot tudi vrednost učinkov, ki se izločijo pri jemanju majhnih odmerkov toksikanta (slika 5 ). Če je cilj zmanjšati nastalo krivuljo "odmerek-učinek", potem se povprečna doza poveča, kar bo vplivalo na učinek spremenljive variabilnosti na strani bioobjekta. Z drugačnim pristopom (povprečni učinki) se izognemo zmanjšanju strmine krivulje odmerek-učinek, skladno z izhodnimi podatki.

Malyunok 5. Učinek krivulje povprečnega odmerka na podlagi različnih podatkov, pridobljenih na več bioloških zdravilih z različno občutljivostjo na sledljivi toksikant. Uporaba metode povprečenja odmerkov, ki povzroči enake učinke (A), daje pravilen rezultat. Metoda povprečenja učinkov (B) povzroči "sploščeno" krivuljo rezultatov.

3.4. Možni učinki številnih strupenih snovi na biološki objekt

Ko se agonisti in antagonisti nanesejo na bioobjekt, lahko pride do različnih sprememb razmerja med odmerkom in učinkom (ki niso povezane z različnimi kemičnimi in fizikalno-kemijskimi interakcijami ksenobiotikov). Najpogosteje registrirane spremembe so:
- Vzporedni prikaz krivulje "odmerek-učinek";
- Zmanjšanje največjih vrednosti krivulje odmerek-učinek;
- Vzporedni zsuv z enournim znižanjem maksimalnih vrednosti.
V tem času se za razlago učinkov, ki se jih bojimo, najpogosteje uporablja poklicna teorija interakcije strupenih snovi in receptorjev.

3.4.1. Vzporedni prikaz krivulje odmerek-učinek

Golovne in najpogosteje pojasnjena razlaga vzporedne krivulje »odmerek-učinek« za govor (A) z enourno infuzijo na biološki produkt (vnesenega v inkubacijski medij) govora (B) z notranjo aktivnostjo E = 0, na podlagi primesi і, kaj (В) є konkurenčni antagonist (A).
Ko na podlagi zasedbene teorije izenačimo enako učinkovite koncentracije agonista v prisotnosti ([A]) in z dodanim antagonistom ([A*]) v koncentraciji skladbe [B], lahko

[A*]/[A] = 1 + [V]/K (16)

Fragmenti koordinat, v katerih se registrirajo učinki, in se izogne vzporedni povezavi, tako kot logaritemu, pri čemer je logaritem obeh delov enak (16)

Log - log[A] = log(1 + [B]/KB) = S (17)

LogK B = log(/[A] - 1) - log[B] (18)

Iz tabele (17) je razvidno, da je vrednost krivulje (S) odvisna le od koncentracije [B] in vrednosti disociacijske konstante za kompleks antagonist-receptor KB (slika 6). Razmerje med velikostjo dražljaja, ki se odzove na agonist, in učinkom na strani biosistema nima enake vloge. Pogosto se za karakterizacijo afinitete antagonista do receptorja uporablja vrednost pA2 = -logK.
Enačbi (16) in (17) se upoštevata, ko je pA 2 številčno enak negativnemu desetemu logaritmu koncentracije kompetitivnega antagonista, v tem primeru je treba dodati vmesni agonist, da se izniči učinek v registru. Jejte brez antagonista.

Slika Teoretična krivulja odmerek-učinek za agonist na podlagi prisotnosti (A) in prisotnosti (A*) v srednji točki inkubacije antagonista pri končni koncentraciji [B]. V inducirani aplikaciji je vrednost S enaka 13 in je izražena kot S = log - log [A]. Na podlagi dejstva, da je S = log(1 + [B]/K D), ga je mogoče določiti eksperimentalno.

3.4.2. Zmanjšanje največjih vrednosti krivulje odmerek-učinek

V številnih epizodah v prisotnosti razmerja med odmerkom in učinkom za agonist (A *) se v prisotnosti antagonista pokaže, da je največji učinek, ki se mu je treba izogniti, dejansko šibkejši, čeprav se mu izognemo. v obeh primerih ali prisotnost antagonista (A). Zmanjšanje maksimalnega učinka, ki ga je mogoče oceniti v stotinah enot, si razlagamo tako, kot izhaja iz stališča okupacijske teorije.
Nekompetitivni antagonist (B*) reagira z receptorjem (R*) biosistema, ne pa tudi z receptorjem R za agonist (A), s katerim se sprošča kompleks, da se zmanjša učinkovitost kompleksa. To vodi do rahlega zmanjšanja notranje aktivnosti agonista E, ki leži v [B *].
Zmanjšanje največje vrednosti krivulje odmerek-učinek je mogoče razložiti z ireverzibilno supresijo receptorja za agonist s kompetitivnim antagonistom (B).
Za karakterizacijo aktivnosti nekonkurenčnega antagonista izračunajte negativni logaritem disociacijske konstante za kompleks antagonist-receptor

LogK B* = pD* 2

Za povečanje te vrednosti je treba eksperimentalno določiti največje možno zmanjšanje učinka agonista v prisotnosti trenutne koncentracije antagonista (E AB*M). Todi

PD* 2 = -log - log[(E AB*M - E A)/(E AB* - E A) - 1] (21)

Enačbo (21) pD2 lahko gledamo kot negativni logaritem koncentracije nekompetitivnega antagonista, s katerim se učinek agonista zmanjša za polovico največje ravni. V tem primeru (E AB*M - E A)/(E AB* - E A) = 2. Da bi poenostavili razvoj, zamenjajte učinek E A z največjimi učinki, ki se razvijejo med operacijo A v različnih glavah: E AM, E AMV, E AMVM.
Ker je učinek agonista mogoče popolnoma blokirati s pomočjo nekonkurenčnega antagonista, lahko vrednost pD*2 izračunamo z enostavnejšo formulo

PD* 2 = -log + log(E A /E AB* -1) (22)

3.4.3. Vzporedna povezava z enournim znižanjem maksimalnih vrednosti

V praksi je izjemno redko srečati zdravila (antagoniste), ki povzročijo vzporeden odziv ali zmanjšanje največje vrednosti krivulje "odmerek-učinek" za agonist. Praviloma so žaljivi učinki. Smiselno je kategorizirati številne ksenobiotike v skupine konkurenčnih in nekompeticijskih antagonistov nizkih receptorjev, ki so lahko v veliki meri mehanične narave. Vendar pa obstaja potreba po močnih značilnostih govora.
rD 2 je zajamčeno enak (22), tako da namesto tega vrednost učinkov E A in E AB predstavlja vrednosti E AM in E AMB (slika 7).

Teoretične krivulje jakosti učinkovitosti agonista [A] v odvisnosti od njegove koncentracije v prisotnosti antagonista srednjega toka [B]. Za razširitev vrednosti pD 2 sledite vikorističnemu razmerju med mentalno enakima učinkovitima odmerkoma [A] in [A *] po določitvi tipov E AM in E AMV *. Stopnja rasti je še naprej enaka (23), po potrditvi dejstva, da je nekonkurenčni antagonist še vedno prisoten.

3.5. Vrednost očitnih disociacijskih konstant za kompleks agonist-receptor

V tem primeru, ker obstaja neposredna povezava med vrednostmi antagonistov pA 2 in pD* 2 na eni strani in disociacijskimi konstantami kompleksa antagonist-receptor, bi radi teoretično izvedeli povezavo med pD 2 in Agon. sto tako, v strogem pomenu Ne, fragmenti med stopnjo tvorbe kompleksa "agonist-receptor" in stopnjo tvorbe učinka ležijo med vmesnimi plastmi biokemičnih in fizioloških reakcij, kot pravilo še zdaleč ni spremenjeno (še bolj neverjetno). To pomeni, da je nemogoče določiti afiniteto toksikanta do receptorja (to je vrednost disociacijske konstante za kompleks "toksikant-receptor") v povezavi z razmerjem "odmerek-učinek", ki se pojavi med poskusom. . Da bi razumeli to kompleksnost, je treba izračunati vrednost eksplicitne disociacijske konstante. Klasična metoda temelji na uporabi nepreklicnega tekmovalnega antagonista.
Leta 1956 je Nickerson odkril, da lahko alkilne spojine, kot so haloalkilamini, kot sta dibenamin in fenoksibenzamin, nepovratno vplivajo na receptorje različnih vrst. Receptorji se vežejo na acetilholinske, histaminske, serotoninske in adrenergične receptorje. Zaradi močne interakcije med inhibitorji in agonisti ter biološkimi zdravili je bilo ugotovljeno, da:
- ugotoviti specifično naravo delovanja haloalkilaminov na receptorsko mesto, ki veže agonist;
- pojasniti razvrstitev receptorjev glede na njihov odnos do endogenih agonistov.
Furchgott je metodo zasnoval na enakih učinkovitih odmerkih agonista, ki jih apliciramo na nedotaknjeno biološko zdravilo in zdravilo, ki je predhodno zdravljeno z inhibitorjem receptorja (sprememba [R] T za vrednost q [R] T).
Učinek, povezan z delovanjem agonista pred blokado receptorjev, opisuje Rivnyan (13), po blokadi - Rivnyan (14). Enak učinek v glavah se razvije za enako velikost dražljaja S. Ker je S = S*, potem je E A /E M = E A* /E M* in tako je kombinirano razmerje 13 in 14 očitno.

1/[A] = 1/q 1/[A] + (1-q)/qK A (23)

Nanos Vibuduyuchu na koordinatah 1/[A] in 1/[A*] je vzet neposredno iz reza 1/q in razrezan na osi 1/[A], raven (1-q)/qK A . Za praktične namene lahko uporabite vicoristovati viraz

K A = (nahil - 1)/vidrazok

Postopek priprave teh predstavitev za Malyunku 8:

Malyunok Vrednost konstante disociacije agonistov, ki nastane na receptorju, občutljivem na muskarin, poznega mesa tankega črevesa morskega prašička.
A). Krivulja odmerek-učinek acetilholina za nedotaknjeno zdravilo (q = 1) in zdravilo, dopirano z 20 klor fenokisbenzaminom (5 µM) (q = 0,1624).
b). Dnevni graf korelacije med enakima efektivnima odmerkoma za nepoškodovano in tretirano zdravilo v koordinatah 1/[A] in 1/[A*] se reducira na ravno črto, na podlagi katere (kot tudi nivoja 23) vrednosti disociacijske konstante je mogoče izračunati.

Razmerje med odmerkom in učinkom v skupini

4.1. Razmerje med odmerkom in učinkom za eno strupeno snov

Z razvojem razmerja "odmerek-učinek" v skupini, ki jo sestavlja veliko število posameznikov, je mogoče izstopiti iz manifestacije motenj zaradi zamude na ravni okoliškega organizma. Dodaten dejavnik, ki vpliva na rezultat, je individualna prilagodljivost.
Čeprav reakcija nekaterih ljudi ali živali v skupini na toksikant ni enaka, bo v svetu prišlo do povečanja efektivne doze, povečala se bo reakcija, povečala se bo resnost učinka in število posameznikov ( posamezniki), pri katerih se razvije Obstaja učinek, ki se ocenjuje. Na primer, če nanesete snov, ki izloča dražilno snov na kožo zadnjih, potem bo v svetu povečanje količine uporabljenega toksičnega sredstva povzročilo: - povečanje števila zadnjih, Nekateri ljudje se bodo odzvali na zbadanje; - Resnost znakov draženja pri preiskovanih se bo povečala. Jasno je, da so vrednosti, pridobljene med delom, posledica poravnave statističnih vzorcev.
Pri vnosu toksikanta v telo pride do učinkov, ki se postopoma manifestirajo znotraj določenega odmerka (na primer znižanje arterijskega tlaka) in učinkov tipa »vse ali nič« (padec/preživetje). V tem primeru je jasno, da je mogoče učinke prve vrste skoraj takoj pretvoriti v obliko, primerno za oceno učinkov druge vrste. Za določitev razmerja med odmerkom in učinkom v skupini se izvedeta do dve vrsti eksperimentalnih poskusov:
- Izslediti skrivnosti podskupin bitij;
- Brez odobritve podskupine.

4.1.1. Analiza odmerek-učinek z metodo oblikovanja podskupin

Največji razmah metode ugotavljanja razmerja odmerek-učinek v skupini je v podskupini, ki se oblikuje v tej skupini. Pri živalih, ki vstopajo v podskupino, se toksikant daje v enakem odmerku, v kožni podskupini pa se odmerek poveča. Oblikovanje podskupin lahko vključuje vrsto naključnih izbir. Z višjimi odmerki bo prišlo do povečanja nekaterih izdelkov v podskupinah kože, ki so razvile učinek, ki se ocenjuje. Obstojnost, ki se v tem primeru izloči, lahko predstavimo s kumulativno frekvenčno krivuljo podskupine, kjer je število živali s pozitivno reakcijo na toksikant (del števila živali v podskupini) funkcijski odmerek (sl. 9).

Tipična krivulja odmerek-učinek za skupino živali je simetrična na sredino (50-odstotna variacija). Glavne vrednosti skupine odzivov na toksikante so okoli povprečne vrednosti.

Večina krivulj ima S-podobno krivuljo glede na logaritemsko normalno porazdelitev, simetrično na sredino. Vidite lahko številne pomembne značilnosti krivulje, ki so pomembne pri interpretaciji rezultatov.
Osrednja točka krivulje (vrednost 50 % vrste) ali povprečna učinkovita doza (OD 50) je preprost način za karakterizacijo toksičnosti govornega sredstva. Učinek, ki se ocenjuje, je smrtnost živali v skupini, ta točka je označena kot srednji smrtni odmerek (razdelitev spodaj). Ta vrednost je najbolj natančna individualna karakteristika toksičnosti, saj je vrednost 95-odstotnega intervala zaupanja minimalna.
Občutljivost večine živali v populaciji je blizu povprečne vrednosti. Interval med odmerki, ki vključuje glavni del krivulje okoli središčne točke, je označen tudi kot "moč" zdravila.
Majhen del populacije na levi strani krivulje odmerek-učinek se odzove na majhne odmerke toksikanta. To je skupina preobčutljivih in hiperreaktivnih posameznikov. Drugi del populacije na desni strani krivulje se manj odziva na velike odmerke toksikanta. To so neobčutljivi, hiporeaktivni in rezistentni posamezniki.
Globina krivulje "odmerek-učinek", zlasti blizu srednje vrednosti, označuje porazdelitev odmerkov, ki povzročajo učinek. Ta vrednost kaže, kako velika bo sprememba v odzivu prebivalstva na dano strupeno snov s spremembo efektivnega odmerka. Bilo bi kul reči, da se bo večina prebivalstva na strup odzvala s približno enako hitrostjo v ozkem razponu odmerkov, tako kot bi težko rekli, da je občutljivost posameznikov na strup zelo različna.
Oblika krivulje in njene skrajne točke so odvisne od številnih zunanjih in notranjih dejavnikov, kot so stanje mehanizmov popravljanja poškodb, reverzibilnost učinkov, ki se sprožijo itd. Tako se toksični proces morda ne razvije, dokler se ne izčrpajo mehanizmi izločanja aktivnega toksičnega sredstva v telesu in se začnejo krepiti procesi biokemične detoksikacije. Tako je lahko ravno pospeševanje procesov izločanja toksičnih metabolitov iz izhodnega ksenobiotika razlog, da krivulja »odmerek-učinek« doseže plato.
Pomembna različica krivulje "odmerek-učinek" je obstojnost, ki se pojavi v genetsko heterogeni skupini. Tako je v populaciji z zelo velikim številom posameznikov, katerih občutljivost na toksične snovi je genetsko fiksirana, mogoče registrirati tipično S-podobno obliko v levem delu krivulje (slika 10).

odmerek

Malyunok 10. Različica kumulativne krivulje odmerek-učinek z izrazito hiperreaktivno komponento

Krivulja "odmerek-učinek" se pogosto pretvori v linearno porazdelitev kemikalij v koordinatah log-protonov (odmerek toksikanta je predstavljen v logaritmih, resnost reakcije v odzivu je v probitih). Ta transformacija omogoča preiskovalcu, da predloži rezultate matematične analize (na primer razširitev intervala zaupanja, strmino vrha krivulje itd.) (slika 11).

Malyunok 11. Rekonstrukcija eksperimentalnih podatkov o določitvi trajanja »ODMERKA – UČINEK«: a) trajanje »UČINEK – ODMEREK«; b) shranjevanje "UČINEK - log DOSI"; c) shranjevanje "PROBIT EFFECT - log DOSI".

Z metodo oblikovanja podskupin je mogoče določiti resnost učinka, ki se ocenjuje (na primer raven arterijskega tlaka, zmanjšana ušesna aktivnost itd.) Za določen odmerek toksikanta. V tem primeru se na podlagi pridobljenih podatkov določi povprečna velikost učinka, ki se je razširila v podskupini tistih, ki so sledili odzivu na dajanje odmerka, pravilni interval indikatorja v kožni točki pa je odločen. Nato bo prikazan graf velikosti učinka danega odmerka z iskanjem aproksimacijske krivulje skozi "temno" točko (slika 12).

Malyunok 12. Krivulja odmerek-učinek za oceno nevroleptičnega učinka antipsihotika pimozida pri intracerebralnih injekcijah. Kožna točka na grafu je narisana na način registracije učinkov, opaženih pri 10 - 20 živalih.

4.1.2. Analiza odmerek-učinek brez oblikovanja podskupin

Z vnosom zdravil, ki se hitro razgradijo in se ne izločijo v celoti iz telesa, je mogoče zagotoviti njihovo interno dajanje laboratorijskim živalim do popolne ugotovitve toksičnega učinka (npr. zmanjšanje pogostosti diareje za 40%). Tako je mogoče, da koža, ki obdaja telo, pridobi odmerek govora, ki povzroči učinek. Preiskave se izvajajo na veliki skupini bitij. Če narišemo graf števila živali, ki ima lahko učinek, ki se razvije glede na velikost različnih odmerkov, potem lahko odstranimo dobro znano S-podobno krivuljo, katere analiza sledi pravilom.

4.1.3. Razmerje med odmerkom in učinkom s kazalnikom smrtnosti

4.1.3.1. Zagalni manifestacije

Smrtni izid po izpostavitvi toksikantu je alternativna reakcija, ki se izvaja po načelu »vse ali nič«, ta učinek velja za najpomembnejšega za določanje toksičnosti snovi, s katerim lahko povečamo povprečni smrtni odmerek (LD 50).
Določitev akutne toksičnosti za indikator "smrtnost" se izvaja z metodo oblikovanja podskupin (čudežno). Toksikant se daje na enega od možnih načinov (enteralno, parenteralno) v kontroliranih pogojih. V tem primeru je treba zagotoviti, da je način dajanja snovi neposredno povezan z vrednostjo toksičnosti (Tabela 4).

Tabela 4. Testiranje toksičnosti sarina in atropina na laboratorijskih živalih

Upoštevajo se bitja enakih pogojev, starosti, vode, kaj se prilega pevski dieti, za potrebne umeščanja, temperature, vlage itd. Raziskavo ponovimo na več vrstah laboratorijskih živali. Po vnosu preskusne kemikalije je treba sprejeti previdnostne ukrepe za določitev števila mrtvih živali, običajno v obdobju 14 dni. Ko je govor nanešen na kožo, je treba zabeležiti uro stika, kot tudi oblikovati aplikacijo (od zaprtega ali odprtega prostora do infuzije). Očitno je, da sta stopnja napetosti kože in resnost resorptivnega delovanja funkcija tako količine uporabljenega materiala kot tudi resnosti stika s kožo. Pri vseh metodah infundiranja je poleg vdihavanja odmerek izpostavljenosti izražen kot masa testirane snovi na enoto telesne mase (mg/kg; ml/kg).
Za inhalacijsko infuzijo je odmerek izpostavljenosti izražen kot količina preskušane snovi, prisotne v enem volumnu izpostavljenosti: mg/m3 ali deli na milijon (ppm – deli na milijon). Pri tej metodi je zelo pomembno upoštevati uro izpostavljenosti. Večji kot je dotok, večja je doza izpostavljenosti, večja je možnost neprijetnega dejanja. Informacije o razmerju med odmerkom in odzivom za različne koncentracije snovi v zraku, ki ga vdihavamo, je treba odstraniti ob istem času izpostavljenosti. Poskus lahko izvedemo različno in različne skupine poskusnih živali bodo vdihovale smolo v enaki koncentraciji, vendar različne ure.
Za približno oceno toksičnosti vdihanih učinkovin, ki hkrati povečajo koncentracijo toksikanta v času izpostavljenosti, je običajno izračunati vrednost "toksodoze", ki temelji na formuli, ki jo je predlagal Haber na začetku .ku stoletnica:

W = C t de

W - toksodoza (mg xv/m 3)
C - koncentracija strupenih snovi (mg/m3)
t - ura izpostavljenosti (xv)

Pričakovati je, da bo pri normalnem vdihavanju govora nov učinek (pogin laboratorijskih živali) dosežen tako s kratkotrajno izpostavljenostjo visokim dozam kot tudi z nepomembnim dotokom govora pri nižjih koncentracijah, pri katerih je potrebna dodatna ura za koncentracijo. govora Občutek krivde se izgubi nespremenjen. Najpogostejši vzrok toksodoze je govorna terapija, ki je bila uporabljena za karakterizacijo bojnih reakcij zastrupitve. Vrednosti toksičnosti aktivnih kemičnih snovi so predstavljene v tabeli 5.

Tabela 5. Toksodoze izločenih snovi (z inhalacijsko infuzijo)

(M. Kruger, 1991)

Krivulja odmerek-smrtnost je običajno podobne oblike krivulji kumulativnega učinka frekvence za druga razmerja med odmerkom in učinkom (bolj neverjetno). Za namene izravnave podatkov in njihove statistične obdelave transformirajte krivuljo v obliko linearne globine, vikoristični koordinatni sistem “log D - preboji”.
Toksičnost na podlagi indikatorja »smrtnost« se običajno ugotavlja na podlagi skupne stopnje smrtnosti živali v skupini. Najpogosteje je kot kontrolna rabarbara 50% smrtnost živali, kar kaže na mediano krivulje porazdelitve odmerka, kjer je največ pozitivnih reakcij pri rabarbari (presenetljivo) simetrično koncentrirano. Ta vrednost se imenuje povprečni litalni odmerek (koncentracija). Pri višjih ravneh ta odmerek klora povzroči smrt polovice živalske populacije.
Koncept dodeljevanja govorov LD 50 je prvi oblikoval Trevan leta 1927. Od tega trenutka se začne oblikovanje toksikologije kot referenčne vede, ki operira s številnimi značilnostmi opazovane moči (količine toksičnosti).
V nasprotju z drugimi stopnjami umrljivosti, ki povečujejo pomembnost, je mogoče izmeriti vrednost LD 5 LD 95, ki je skladna z zakoni statistike, blizu praga in največje toksičnosti ter med intervalom odmerkov, znotraj katerega, v bistvu je učinek realiziran.
Etično in ekonomično martirizacijo pri največji vrednosti LD 50 izvajamo z uporabo minimalnega števila laboratorijskih živali. V povezavi s cym je pomen vrednosti šukane vedno povezan s faktorjem nepomembnosti. Ta nepomembnost je zagotovljena z iskanjem 95 % intervala zaupanja vrednosti, ki se izračuna. Odmerki znotraj tega razpona so zmerno smrtonosni s stopnjo smrtnosti manj kot 5 %. Interval zaupanja vrednosti LD 50 je bistveno manjši od intervala zaupanja odmerkov druge enake letalnosti, kar je dodaten argument za učinkovitost značilnosti parametrov akutne toksičnosti.
Kot je bilo že navedeno, je pomembna značilnost vsake krivulje "odmerek-učinek" njena strmina. Torej, ker imata obe besedi statistično nepomembne vrednosti za LD 50 in pa strmino krivulje toksičnosti "odmerek-učinek" (potem so statistično nepomembne vrednosti podobne LD 16 in LD 84), je stopnja smrtnosti za indikatorjem je ekvitoksičnost v širokem razponu odmerkov (govora A in B na sliki 13). Vendar so reke, ki imajo podobne vrednosti vrednosti LD 50 in strmine krivulje toksičnosti, zelo zaskrbljene zaradi svojih toksičnih moči (reka 3 na sliki 13).

Malyunok 13. Razmerja "odmerek-učinek" toksikantov s podobnimi vrednostmi vrednosti LD 50 in različnimi stopnjami naklona

Govor s pavšalnim razmerjem "odmerek-učinek" postane zelo nevaren za posameznike z izrazito preobčutljivostjo na toksične snovi. Reke z veliko strmino akumulacije so bolj nevarne za prebivalstvo, saj prenašajo višjo dozo od minimalne, ki je potrebna za učinek pri večini prebivalstva.

4.1.3.2. Vrednosti varnih odmerkov toksikantov

V številnih primerih je treba skrbno določiti vrednost največjega neaktivnega (varnega) odmerka toksičnih snovi.
Metodologijo te naloge je predlagal Goddam. Preiskava bo temeljila na ugotovljenem razmerju med odmerkom in učinkom v skupini živali. Pomembno je, da je učinek, ki ga ocenjujemo, občutljiv in ne v alternativni obliki (npr. zmanjšana encimska aktivnost, zvišan arterijski tlak, povečana rast, okvara hematopoeze itd.). Graf trajanja bo na koordinatah "logaritem odmerka - velikost učinka". Analiza krivulje vam omogoča, da ocenite nizke kazalnike. Fragmenti krivulje imajo praviloma obliko S, ki se pojavlja kot ploskev, znotraj katere so usedline linearne narave. Določite strmino premice (b). Učinek praga (y S) se izračuna po formuli: y S = tS, kjer je t Studentov koeficient, ki je naveden v naslednjih tabelah; S je vrednost standardne dobave, ki je izračunana iz veleprodajnih podatkov. Mejni odmerek (DS) – to je odmerek, pri katerem snov povzroči mejni učinek. Za varen odmerek (DI) je možno

Log D I = log D S - 6(S/b)

Zadnjica za dojenčka 14

Krivulja odmerek-učinek(Ali učinek koncentracije) opisuje spremembo v infuziji danega liganda na biološki objekt glede na koncentracijo tega liganda. Takšno krivuljo lahko opazimo tako za posamezne celice ali organizme (če majhni odmerki ali koncentracije povzročijo šibek učinek, veliki odmerki pa povzročijo močan učinek: stopenjska krivulja) ali za populacijo (pri tej vrsti populacije v nekaj sto posameznikov koncentracija ali odmerek liganda vpliva na učinek: korpuskularna krivulja ).

Glavna parametra, ki sta določena v vsakem modelu, sta največji možni učinek (E max) in odmerek (koncentracija), ki povzroči največji učinek (ED50 in EC 50 na dan).

Pri izvajanju te vrste preiskave mora mati upoštevati, da mora razmerje med odmerkom in učinkom ostati od časa izpostavljenosti biološkemu objektu do konca preiskave (vdihavanje, zaužitje, zaužitje na Iru nato ), to je močna ocena učinka v različnih Čas izpostavljenosti in različni načini vstopa liganda v telo pogosto vodijo do različnih rezultatov. Tako lahko v eksperimentalni preiskavi te parametre poenotimo.

Moč je ukrivljena

Krivulja odmerek-učinek je dvodimenzionalni graf, ki prikazuje resnost reakcije biološkega objekta glede na velikost stresnega dejavnika (koncentracija strupene snovi ali onesnaževala, temperatura, intenzivnost reakcije itd.). Pod "reakcijo" si lahko preiskovalec zapomni fiziološki in biokemični proces ter določi stopnjo umrljivosti; Vendar lahko posamezne smrti vključujejo številne posameznike (z različnimi stopnjami umrljivosti), urejene opisne kategorije (na primer stopnja upadanja) ali fizikalne in kemične enote (višina krvnega tlaka, aktivnost encimov). Glede na klinično preiskavo opazimo številne učinke na različnih organizacijskih ravneh predmeta preiskave (klinični, tkivni, organizmski, populacijski).

V primeru dnevnega odmerka se navede odmerek preskušanega zdravila oziroma njegova koncentracija (izračunana v miligramih ali gramih na kilogram telesne teže oziroma v miligramih na kubični meter prostornine pri inhalaciji) in je vzdolž abscisne osi. , velikost učinka pa je vzdolž ordinatne osi. V določenih situacijah (kar pomeni, da obstaja velik razkorak v odmerkih med najmanjšim učinkom, ki ga je mogoče zabeležiti, in največjim možnim učinkom) se na ordinatni osi prikaže logaritemska skala (ta možnost se imenuje izvirne koordinate »superlogaritma«) ). Najpogosteje ima krivulja odmerek-učinek sigmoidno obliko in je opisana s Hillovimi enačbami, kar je še posebej očitno v sublogaritemskih koordinatah.

Statistična analiza krivulje se izračuna z uporabo statističnih regresijskih metod, kot so probit analiza, logit analiza ali Spearman-Kerberjeva metoda. V tem primeru bodo modeli, v katerih je uporabljen nelinearni približek, verjetno zagotovili prednost v primerjavi z linearnimi ali lineariziranimi, saj se empirični pojav zdi linearen v primerjavi z opazovanimi Intervali: mora temeljiti na dejstvu, da je v absolutni večini odmerkov mehanizmi učinka, mehanizmi razvoja učinka so nelinearni, eksperimentalni Podatki se lahko zdijo linearni za določene specifične pogoje in/ali intervale odmerjanja.

Dokončajte tudi delno analizo krivulje odmerek-učinek in njen približek Hillovim enačbam pomembne stopnje sodelovanja pri učinku.

Razmerja "odmerek-učinek" v gradientu pomembnosti za večino parametrov so imela majhen nelinearen videz in so bila razdeljena na polja odmerka v bližini podjetij, ki so morala delovati, samo "visok" "korak", nato raven intenzivnosti spremeni vrednost parametrov v območju visoke intenzivnosti. "Višina koraka" v depozitih odmerkov se je spremenila v urah in sprememba "višine koraka", kot je pokazala naša raziskava, je bila v tem urnem intervalu videti povezana z višjo stopnjo spremembe prikaza brez v območju srednje in visoka intenzivnost na listne uši nizke virulence, ki spreminjajo parametre partnerstva v območju nizkega tlaka.

Razmerje med odmerkom in učinkom. Odziv telesa na infundiranje določa količina oteženega govora oziroma doze v telesu, katere količina je določena z načinom vstopa v telo – z vdihavanjem (inhalacija), z vodo ali (oralno), bodisi se absorbirajo. skozi kožo ali pa dotok dobimo s pomočjo zunanje absorpcije . Vdihavanje in oralna pot zagotavljata biokemične metode vnašanja onesnaževal v telo. Na splošno človeško telo začne razstrupljati onesnaževalce, zato se je učinkoviteje spoprijeti z njimi kot si pomagati z vdihavanjem.

Krivulje "odmerek-učinek" (slika 5.8) označujejo razdaljo med odmerkom in reakcijo v odzivu (učinku) telesa. Na podlagi teh epidemioloških študij je mogoče določiti razmerje med "odmerkom in učinkom" za ljudi in živali.

PIDHID »ODMEREK-UČINEK« – vzpostavitev interakcije med stopnjami dotoka v ekosistem – doza – (na primer obstrukcija) in posledični učinek. Analiza doze in učinka omogoča ugotavljanje intersticijske stabilnosti ekosistema ter oceno morebitne okoljske škode zaradi dotoka.

Učinek odmerek-učinek fototropizma je precej zapleten, vendar se zdi na prvi pogled. Tako je bilo v poskusih na etioliranih koleoptilih ugotovljeno, da se z naraščajočim številom viginskih subdivizij neposredno do nivoja svetlobe povečuje, vendar do vrednosti praga svetlobe (približno OD J m 2 svetlobne energije ii) translokacija katerega koli svinca do reakcija v vodstvu se zmanjša na določeno vrednost, če se »pozitivna reakcija« lahko spremeni v »negativno« (potem [...]

Lekcija 3. Ocena trajanja "učinka odmerka". Na tej stopnji se zbirajo obsežne informacije o razmerju med danimi odmerki in učinki na zdravje.

Za misli linearnih razmerij med odmerkom in učinkom so bile določene vrednosti aproksimacijskih koeficientov, ki lahko fizično nadomestijo koeficiente tveganja.

Krivulja 4 – nelinearno razmerje med odmerkom in učinkom s konveksnostjo proti dnu – je prav tako značilna za odziv telesa na različne dejavnike. Ti inodi se imenujejo "sublinearna" razmerja med odmerkom in učinkom. Čeprav krivulja 4 nima jasno definiranega praga, točka na osi, če je mogoče registrirati učinek, kaže praktično vrednost praga.[...]

Krivulja 2 - nelinearno razmerje "odmerek-učinek" s konveksnostjo - predstavlja "supra-linearno" razmerje, ki preprečuje, da bi majhni odmerki povzročili nesorazmerno velike učinke. Rezultati spremljanja posledic nesreče v Černobilu na prebivalstvo kažejo na prisotnost takega potenciala za učinke sevanja v nizkoodmerni galusi.

Čeprav je težko uporabljati majhne odmerke, se za ocenjevanje učinkov pri tovrstnih motnjah in motnjah, ki ne trdijo za natančnost, zanašamo tudi na časovne intervale. Posledica tega je linearno razmerje med odmerkom in učinkom.

Za prenos pogostosti epizod stohastičnih učinkov med ravnmi sevanja je priporočljivo nadomestiti linearno razmerje med odmerkom in učinkom s podobno dozimetrično vrednostjo, v tem primeru pa obstaja ekvivalentna doza. Pomembno je omeniti, da pri velikih odmerkih potencial za nestohastične učinke povzroči zanemarjanje efektivnega ekvivalentnega odmerka. Zocrema, visok odmerek dajanja na prizadeti organ lahko povzroči nestohastične učinke, čeprav se nestohastičnim učinkom ne izognemo, če isti odmerek dajemo celotnemu telesu.

Krivulja 1 kaže, da obstaja podobna B-podobna dolgotrajnost učinka glede na odmerek, dnevnim spremembam v presnovi človeškega telesa pa se ne izognemo. Krivulje 2, 3 in 4 se prenesejo na ravni brez praga: prenesejo se, da razkrijejo učinke pri kateri koli koncentraciji onesnaževala ali kateri koli želeni majhni nekemični infuziji. Podobne krivulje predstavljajo razred stohastičnih učinkov na zdravje. Linearna, brezpražna oblika razmerja "odmerek-učinek" 3 je najbolj splošno sprejeta, saj je presoja o obliki razmerja "odmerek-učinek" v območju majhnih vrednosti pogosto onstran prednost linearne ekstrapolacije v območju visokih odmerkov.

Tako lahko GDC razumemo kot točko v razmerju med »odmerkom in učinkom«, ki ločuje območje največjega možnega odmerka od območja odmerkov, ki veljajo za neprijetne ali nevarne za ljudi.

Za preverjanje določenega dodatka in določitev narave usedlin "doza-učinek" v primeru očitno nekonvencionalnega toka v okolje onesnaževalnih tokov v okolici termoelektrarne (Reftinskaya GRES, Srednji Ural; glavne komponente hidroksidov so dioksidni oksidi, dušikovi oksidi in kalcijeve trdne) kamnine na trajnih Na poskusnih ploskvah je bila izvedena ocena stanja zeliščno-tegarske plasti gozdnih fitocenoz s sintopsko registracijo pojava onesnaženih rek. V bližini tega podjetja, ki deluje že od sedemdesetih let 20. stoletja, so bili na začetku opaženi znaki degradacije gozdnih ekosistemov predvsem zaradi faze osutosti krošenj drevesnega sloja in spremembe kalitvenega ekobiomorfa v travnato- plast čajnega čaja.

Treba je ublažiti fizikalno in kemično sestavo onesnaževal ter učinke njihovega vdora na rast. Nekatere znatne koncentracije komponent z avtomatskimi analizatorji nam ne omogočajo predvidevanja vseh možnih učinkov dotoka onesnaženega zraka, uporaba biomonitorjev pa nam ne omogoča ocene stopnje onesnaženosti zraka.nadzor koncentracije kožnega fitotoksikanta. Zato je treba metodo ocenjevanja kombinirati z vrsto spremljanja. Spremembe koncentracije onesnaževal, spremembe parametrov usedlin in doze - učinek prilagajanja meteoroloških parametrov je lahko datum zunanjih pojavov onesnaževal.

Razvoj pristopov k celoviti analizi naravnega okolja mora vključevati preučevanje "odmerka-učinek" in "odziv na odmerek" v različnih poskusih, preučevanje hranilnih pragov v kombinaciji z različnimi dejavniki in pritokom bogatih povprečnih problemov. Nyuvachev, razvoj metod za ocenjevanje odziva zložljivih ekoloških sistemov na spremembe v naravnem okolju.[...]

Različne metode razvoja bodo temeljile na identifikaciji slabosti, čemur bo sledila vzpostavitev razmerij »odmerek-učinek« in negotovosti, ki hkrati določajo značilnosti tveganja. Skupna ocena dodeljenega časovnega obdobja daje visoko stopnjo korelacije med stopnjo negotovosti in indikatorji zdravja.

Znanost je razvila številne pristope k razvoju teh standardov. Njihov glavni poudarek je na analizi razmerja med odmerkom in učinkom, ki povezuje antropogeni vnos kot vhodni parameter ekosistema z njegovim izhodnim parametrom.

Tako so raziskave pokazale, da lahko šibko izražene spremembe parametrov razmerja "odmerek-učinek" praviloma vodijo do nelinearnega videza. Nelinearnost razmerij "odmerek-učinek" je posledica različne fluidnosti spreminjanja parametrov v gradientu tlaka, stopnja obstrukcije pa določa čas stabilizacije parametrov v danem stanju tj. Najnižji čas stabilizacije je značilen za zelo pomembna območja, zato ima razmerje "odmerek-učinek" nelinearen videz, kar se še posebej jasno kaže na območjih podjetij, ki delujejo dlje časa (vpliv jasno vidna cona in cona industrijske puščave). Različna nihanja, ki nastanejo v vrsti zaradi medsebojnega delovanja eksogenih in endogenih dejavnikov, delujejo kot posrednik prenosa iz ene države v drugo, kar je posledica stopnje intenzivnosti nihanja med različnimi območji pozornosti, oblike »odmerka«. učinek« se lahko vloge sčasoma spremenijo. Ko imate opravka s težkimi govori, se lahko pojavijo številne mejne vrednosti in področja časovno odvisne stabilizacije parametrov (kaskadni učinek).

In vendar je pomembno posvetiti veliko pozornost pristopu k konceptu "rafiniranega" odmerka (to je navedeno v delu). Potrebno je, da se transformacijski procesi držijo linearnega zakona in da je razmerje med "odmerkom in učinkom" linearno, infuzija pa je sorazmerna z odmerkom in integralnim nivojem namesto zastojev in posledičnih sinergijskih učinkov. Prav tako je treba domnevati, da bo hospitalizacija prenesena v urah. Bolj kompleksen model je indiciran za zastoje, kjer so ustrezni nakloni v prostoru v uri.

Še enkrat je treba opozoriti, da ocene dolgoročnih tveganj za zdravje ljudi zaradi zgodnje izgube nosečnosti v različnih fazah požarnih ciklov žal ne temeljijo na natančnih podatkih o "odmerku in učinku". V tujih študijah je razmerje med koncentracijo in tveganjem za zdravje »odmerek-učinek« linearno. Za 0x in leteči pepel so lahko takšni pojavi bistveno manj natančni in bodo zahtevali nadaljnja pojasnila.

V praksi je malo težav z zanesljivimi vrednostmi normativnih kazalnikov. Smrdi, vonjave, kriki gub v vsakdanjem življenju »odmerek-učinek«, določen s tem, kaj je dovoljeno med spremembami v ekosistemu. V ekonomskem normativu je bila upoštevana bistvena kompleksnost takega ocenjevanja in nejasnost pri izbiri parametrov, ki označujejo moč toka in živahnost ekosistema.

Ključne besede -, pomembne kovine, kislost, gozdna stelja, industrijska kontaminacija, biotestiranje, fitotoksičnost, zdravilni kulbab, ekstenzivno kuhanje, skladiščna doza-učinek, Srednji Ural.

Torej so bile vse raziskave teh robotov izvedene v bližini dolgotrajno (več kot 50 let) delujočih podjetij in vrednost parametrov v bližini takšnih podjetij na področju nizkega in velikega pomena se skozi čas nekoliko spreminja ( Pipes ina, 1996; Trubina, Makhnev, 1997), ni jasno, nelinearna narava odnosov med »odmerkom in učinkom« pa se sredi obstruktivnih govorov razčisti z manj truda in tako povzroči videz ne- linearni učinek.

Očitno je pri majhnih vrednostih faktorja, ki prevladuje, sistem sposoben ugasniti notranja nihanja in zunanje pritoke ter ostati v stanju dinamičnega ravnovesja blizu stacionarnega stanja. Lahko se domneva, da je nelinearnost razmerij "odmerek-učinek" v prostoru posledica zelo nizke hitrosti spreminjanja parametrov v krogu majhnega pomena in visoke hitrosti spreminjanja v krogu velikega pomena, in vlogo remixerja (sprožilca) iz enega cikla v drugega igrajo različna nihanja, ki so posledica interakcije eksogenih in endogenih dejavnikov.

Pomembno je omeniti, da ima gradient uradnika številne kritične točke - kaskadni učinek (Trubina, 2002), in tiste, ki se "mešajo" iz enega stanja v drugega, so podedovana iznorična nihanja parametrov partnerstva. Pri teh robotih je bilo dokazano, da imajo lahko različna nihanja največjo amplitudo v območju prednosti, ki prinaša močno spremembo parametrov spojin. Pritok različnih nihanj na obliki usedlin "doza-učinek" za druge funkcionalne parametre travno-čajnikovega sloja (bioma) bo prikazan in z dotokom pomembnih kovin iz žveplovega dioksida, ki vsebuje žveplov dioksid (Vorobeichik, 2003). ).

Zdravilni učinek je prisoten v količini zaužitega govora (odmerku). Učinek je dnevni, saj je odmerek, ki ga apliciramo, zelo nizek (podpražni odmerek) in ne doseže minimalne terapevtske ravni. Z večjim odmerkom se resnost učinka poveča. Za oceno kliničnega učinka uporabite krivuljo odmerek-učinek. Tako antipiretični učinek ocenjujemo z znižanjem telesne temperature, antihipertenzivni učinek pa z znižanjem arterijskega tlaka.

p align="justify"> Pri nekaterih ljudeh se trajanju učinka v odvisnosti od odmerka ne izognejo, vendar se enak učinek doseže z različnimi odmerki zdravila. To je še posebej jasno izraženo v reakcijah "brez učinka / brez učinka".

Kot zadnjica lahko povzročite pojav upognjenega repa pri miših (A). Bele miši se na dajanje morfija odzovejo z motnjami, kar je opazno zaradi nenavadne oblikovanosti repa in konic. V skupini 10 miši so izvedli cepljenje z naraščajočim odmerkom morfija. Manj občutljiva bitja reagirajo na majhen odmerek morfija; s povečanim odmerkom se pri večini miši izognemo pojavu upognjenega repa; pri zelo visokem odmerku se odzove celotna skupina (B). Tako obstaja interakcija med pogostnostjo reakcije (število reagirajočih osebkov) in danim odmerkom: pri odmerku 2 mg/kg reagira 1 žival od 10, pri odmerku 10 mg/kg - 5 10.

Doza za zakonca – število odzivnih posameznikov (frekvenca reakcije) je označeno z različno občutljivostjo posameznikov in sledi normalni porazdelitveni krivulji (B, desnosučno). Ker ima frekvenca odziva na odmerek logaritemsko porazdelitev kot S-podobna krivulja (B, levosučna), potem prevojna točka kaže odmerek, če se polovica spodnje skupine odzove na zdravilo. Razpon odmerkov, v katerem se ustrezen odmerek spreminja - pogostost reakcije je označena s spremembami individualne občutljivosti kot povprečne vrednosti.

Ustrezen odmerek - učinek pri ljudeh je težaven, preostali učinek je odvisen od posameznika. Reprezentativni podatki so izbrani iz kliničnih študij in povprečni. Zato je priporočljivo, da so terapevtski odmerki primerni za večino bolnikov, lahko se pojavijo simptomi in bolezni.

Razlika v občutljivosti je lahko posledica dejavnikov (enaka koncentracija v krvi, različna koncentracija v krvi) ali (enaka koncentracija v krvi, različen klinični učinek).

Imenuje se veja klinične farmakologije, ki se ukvarja z razumevanjem vzrokov za različne individualne odzive ljudi na zdravila. Pogosto je osnova za ta učinek v razlikah v encimskem naboru in aktivnosti encimov. Vključiti je mogoče tudi etnične značilnosti. Preden predpiše kakršno koli zdravljenje, mora zdravnik upoštevati bolnikovo presnovno stanje.

Koncentracija spojine – učinek

Za določitev terapevtskega ali toksičnega učinka medicinskega govora razmislite o njegovem dajanju v okoliške organe. Na primer, pri analizi pretoka krvi v krvni obtok se spremlja reakcija krvnih žil. Diya likiv vichaet eksperimentalni umi. Tako žilno-zvočni učinek spremljamo na izoliranih preparatih, vzetih iz različnih odsekov žilnega korita: aksilarne vene noge, portalne vene, mezenterične, koronarne ali bazilarne arterije.

Vitalnost bogatih organov je podprta z razvojem pevskih misli: temperatura, prisotnost žil in kislost. Odziv organa na fiziološko in farmakološko aktivno snov se določi s pomočjo posebnih vibracijskih naprav. Na primer, zvok krvne žile se posname s spreminjanjem položaja med dvema rokama, da se žila raztegne.

Poskusi na izoliranih organih so malo uspešni.

Natančneje se določi koncentracija tekočin v posodah.
Popolnost učinka.
Število učinkov, povezanih s kompenzacijskim delovanjem v celotnem organizmu. Na primer, hitrega povečanja srčnega utripa pod dotokom norepinefrina ni mogoče registrirati v celotnem organizmu, kot posledica ostrega gibanja arterijskega tlaka sproži reverzno regulacijo, kar vodi do bradikardije.
Možnost doseganja največjega učinka. Na primer, negativnega kronotropnega učinka ni mogoče uporabiti za celoten organizem do jedra.

Cepljenje teh organov in izoliranih organov je lahko omejeno.

Uničenje tkanin med pripravo.
Izguba fiziološkega nadzora nad delovanjem izoliranega organa.
Nefiziološka dovkilla.

Pri enaki aktivnosti različnih tekočin nekateri deli mreže niso prisotni.

Celične kulture, pa tudi izolirane notranje celične strukture (plazemska membrana, endoplazmatski retikulum in lizosomi) se pogosto izolirajo iz izoliranih organov za presaditev človeških celic. Bolj ko je eksperimentalni predmet »zrnat«, težje je dodatno ekstrapolirati eksperimentalne podatke na celoten organizem.